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動物行為實驗方法硬核總結:主被動回避實驗
點擊次數:37 發布時間:2020-09-01

大小鼠穿梭實驗(主被動回避)方法

active avoidance test

一.實驗原理

穿梭實驗(active avoidance)是定量測定動物行為學改變的重要手段,屬於經典的聯合型學習條件反射,動物通過學習能回避有害的刺激。穿梭實驗底部為不鏽鋼柵,使用電流加非條件刺激,電擊動物足底。頂部配置有噪聲發生器或光源,用來產生條件刺激。條件刺激數秒鍾後電擊。若在鈴聲刺激安全間隔期內大鼠逃向安全區則為主動回避反應;如果在條件刺激安全間隔期內大鼠未逃向安全區,則通以交流電擊後逃向安全區的為被動回避反應陽性,否則為主動、被動回避反應陰性,此為一個循環周期。經過反複訓練後,隻給條件刺激,大鼠即逃到對側安全區以逃避電擊,此即形成了條件反射或稱主動回避反應,計算機自動控製係統可記錄相關的動物行動參數。主動回避時間是指動物接受條件刺激的時間長短,該值越短,說明動物主動回避反應越迅速,學習記憶能力越強。

 

該實驗廣泛用於學習記憶功能、認知神經科學、神經生理學、神經藥理學、認知功能退行性變性等實驗研究方麵的研究,簡單易操作,容易判別結果,可信度高,既可單獨作為檢測實驗提供課題參數,也可以作為其他學習記憶和認知功能實驗的輔助或預篩選實驗。

二.實驗裝置

廠家:上海芭乐app在线观看信息科技有限公司

型號:XR-XC105

材質:采用無味的ABS塑料材質,顏色為黑色(內側壁)

組成:SuperAPAS穿梭實驗視頻分析軟件、穿梭箱(大小鼠、底部可通電)、SuperShocker刺激控製器以及隔音箱、揚聲器、視頻設備

三.實驗方法

1. 在實驗前1-2天,每天撫摸實驗動物1-5min,借以消除實驗動物對實驗者的恐懼。

2. 訓練期:先讓動物在測試箱中自由活動5min,以消除探究反射。將動物置於穿梭實驗箱電擊區。先給予條件刺激(燈光)和(或)蜂鳴音(純音刺激)20 s(時長可調節)然後給以10s(時長可調節)電刺激(電強度為0.2-0.8mA可調節)。如果在亮燈或聲音響20 s內大鼠逃向安全區為主動回避反應,電擊後才逃向安全區為被動回避反應。經過數次訓練後,大鼠可逐漸形成主動回避性條件反應,從而獲得記憶。共訓練20~40次即設定測試次數為20~40次。

3. 正式測試期:做實驗時,將實驗動物置於穿梭箱電擊區,方法步驟同訓練期。記錄動物遭受電擊的次數(被動回避的次數)以及動物主動回避的次數也可以記錄動物主動回避平均反應時間,該值越小,說明動物主動回避反應越迅速。

四.實驗數據

主要應用的實驗數據:                        

1.觀察時間,動物在實驗箱中活動的總時間,該值越小,說明動物發生主動回避次數越多                          

2.主動回避次數,實驗開始後動物在燈光聲音發生過程中逃至安全區的次數

3.被動回避次數,動物受到電刺激發生躲避逃至安全區的次數

4.主動回避平均反應時間,記錄每次從燈光或聲音開始到發生主動回避的時間,將其累計總和除以主動回避次數得到該值

5.被動回避平均反應時間,記錄每次從電刺激開始到發生被動回避的時間,將其累計總和除以被動回避次數得到該值

6.其餘指標:無反應次數、主動回避潛伏期、被動回避潛伏期

其中主動/被動回避次數指標作為評價學習記憶能力重要指標,主動回避次數值越大,說明動物記憶能力越好,主動回避平均反應時間值越小,說明動物記憶越深刻,反應越迅速

五.注意事項

1. 保持實驗室安靜,光線不宜過強,盡量避免給動物額外刺激。2. 實驗中應及時清除銅柵上的糞便等雜物,以免影響刺激鼠的電流強度。3. 動物在24h內有其活動周期,故每次實驗應選擇同一時間(上午8~12點或下午1~4點),前後2天的實驗要在同一時間內完成。

4.  電柵欄每次清洗後需要等完全幹燥以後再次使用,以免引起電流刺激不均勻或者短路。

5.  如果老鼠長時間逗留徘徊在實驗箱中間過道門位置,在正常人為幹擾下也不能離開,應該考慮剔除該數據。

6.  在電刺激時候,有些動物會選擇一些特殊的方式來躲避,比如瞬間多次跳躍或者支撐性站立起來,這些偶然情況也會導致正常的主被動回避次數出現較大誤差,也應該考慮剔除。

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