產品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術與支持 > 習得性無助抑鬱動物模型的建立與條件性回避反應實驗方法
習得性無助抑鬱動物模型的建立與條件性回避反應實驗方法
點擊次數:686 發布時間:2020-05-25

該模型的理論依據來源於Beck的抑鬱症認知理論,並由Seligman和Overmier*提出。當機體遭受到不可逃避的厭惡性刺激(如足電休克)時,會產生一種絕望行為,表現為對刺激的不再逃避,即使在可逃避的環境下也呈現出操作行為缺欠,如逃避行為障礙及自發活動減少等,同時可伴有其他行為改變,如食欲下降、體重減輕、運動性活動減少以及攻擊性降低等,此時動物的腦內兒茶酚胺水平降低,被公認為是一種抑鬱狀態,抗抑鬱藥可以對抗這種狀態。

獲得性無助的動物產生的行為欠缺可以在亞慢性(3-7天)的抗抑鬱藥物治療下產生翻轉,三環類抗抑鬱劑、單胺氧化酶抑製劑、非典型抗抑鬱劑均可觀察到相應的藥效。獲得性無助由兩個部分組成,第yi部分為獲得性無助抑鬱動物模型的建立,第二部分為條件性回避反應學習期。

實驗設備

由透明的有機玻璃製成一個有蓋的20´10´10 cm3 籠子,籠底由不鏽鋼柵(1.5 cm 間隔)製成,側壁及頂蓋上均有通氣孔。籠底的不鏽鋼柵可通電流,電流由發放命令的控製盒控製,一般發放的電流強度為0.8 mA,持續1-15 s,每1min ± 15 s給一次點擊(電擊持續時間和間隔時間均為隨機性的)。――――大鼠適用

實驗方法

1. 獲得性無助抑鬱動物模型的建立

通過有蓋的20´10´10 cm3 籠子內的不鏽鋼柵傳送60次隨機的無法逃避的足部電擊(0.8 mA,持續1-15秒,每1min ± 15秒給一次電擊)。

模型大鼠連續兩天進行不可逃避的足底電擊。對照大鼠放於相同籠中1小時,但不給予電擊。

2. 條件性回避反應學習

在不可逃避的電擊48 h之後(電擊後的第3 天)開始進行回避訓練,以便於評價逃避和回避行為。實驗時,使用 60´21´30 cm3的穿梭箱,其底麵由不鏽鋼柵構成(1.0 cm 間隔),穿梭箱被一塊帶有7´7cm2小門的不鏽鋼板隔成兩個相同的箱子。

將動物單個地放入穿梭箱的一端,使其適應測試環境5 min。每次訓練的初3 s出現一個光或聲音信號,允許動物在此期間到達另一端的箱中以回避電擊。若此間無回避反應發生,則光/聲音信號停止後出現一個0.8 mA的足部電擊(持續30s)。若此間無逃避反應發生,則電擊信號停止,同時將此記作一次逃避失敗。共刺激30次,刺激間隔60s,逃避時間>33s為失敗,逃避時間<33s為成功。抑鬱大鼠失敗>10次,未learned heleplessness大鼠逃避失敗<5次。在檢測後當天給藥,此後第4、5、6和7天每天給藥一次,第7天給藥後第二次進行穿梭檢測,以評價相關抗抑鬱藥的藥效。

 

 

采集數據

1.穿梭失敗次數(穿梭總次數30次)

穿梭失敗次數>10次――――抑鬱大鼠

2.穿梭逃避延遲時間――――抑鬱大鼠的延遲時間顯著高於正常對照組大鼠。

注意事項

1. 實驗前一周大鼠開始單籠飼養,實驗後動物也需繼續單籠飼養。

2. 實驗前大鼠體重在200g左右,在穿梭檢測時體重不超過300g。大鼠的體重過高或過低均會影響電擊的效果及模型的製備。

3. 動物品係不同對於獲得性無助反應的建立有影響。不同品係的大鼠對逃避行為的缺欠有著明顯的影響。本實驗室用雄性SD大鼠的製備出獲得性無助行為的比率約為50%,但是用雄性Wistar大鼠低於50%。

4. 獲得性無助動物模型的複製多用雄性大鼠,很少用雌性大鼠。由於雌性大鼠會受到性周期的影響,所以會使實驗數據產生波動。

5. 檢測獲得性無助動物逃避行為的缺欠多使用穿梭箱法,也可使用跳台箱法。使用穿梭箱法適應,當適當增加訓練的難度以減少隨即逃避行為的概率。

6. 獲得性無助動物模型的複製過程中應注意不鏽鋼柵的金屬部分短路,或者是大鼠糞便造成的短路。每晚一隻大鼠要注意用清潔的水清洗不鏽鋼柵,盡量烤幹水分,避免影響電流強度。

7. 在進行不可逃避足底電擊時,大鼠會通過站立、背靠金屬柵等多種姿勢減少足底電擊刺激,從而影響電擊的效果。

8. 不可逃避足底電擊製備的獲得性無助動物模型保持逃避行為的缺欠狀態7-10天。

歡迎推薦關注公眾號:bioviewer,專注於動物神經科學與行為學實驗知識的視頻分享與交流。

 

聯係人
在線客服
用心服務 成就你我