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高架十 字迷宮與針刺zhi療大鼠酒精戒斷焦慮征的作用機製
點擊次數:578 發布時間:2020-04-07

摘要:目的:觀察針刺對大鼠酒精戒斷焦慮樣症狀的zhi療作用,探究針刺zhi療大鼠酒精戒斷焦慮樣症 狀的作用機製。方法:選取健康的SD大鼠,隨機分組,分為空白組、模型組、三陰交組、足三裏組、電針 兩穴(三陰交+足三裏)組、針刺兩穴陰交+足三裏)組,連續腹腔注射酒精(ethanol,Eth) 28 d,製備酒 精成癮模型,撤酒精3 d,製備酒精戒斷模型,撤酒精期間分別針刺相應穴位進行zhi療,針刺3 d,高架十 字迷宮(EPM)測其焦慮行為,ELISA測海馬中促腎上腺皮質ji素釋放ji素、環磷酸腺苷濃度。結果:與 空白組比較,酒精戒斷大鼠停留在開放臂的次數和時間明顯減少(P<〇.〇5),海馬中cAMP、CRH的濃度 明顯升高(P<〇. 01);與模型組相比較,電針兩穴組和針刺兩穴組在EPM開放臂的的停留次數、時間明 顯地增加(P<〇.〇5),海馬中cAMP、CRH的濃度明顯降低(P<0.01),而單穴位組對各檢測指標的作用效 果不明顯(P>0.05)$結論:針刺能緩解酒精戒斷焦慮征大鼠的焦慮,其抗焦慮的作用機製可能與調節 大鼠腦內海馬組織中cAMP-CRH相互作用有關。

關鍵詞:針刺;焦慮;酒精戒斷;促腎上腺皮質ji素釋放ji素;環磷酸腺苷

 

實驗儀器

高架十字 迷宮:上海芭乐app在线安装信息科技有限公司

 

行為學指標測試

實驗室內光線昏暗並保持恒亮,室溫24°C,保持 安靜。將每隻大鼠置於高空十字架(EPM)的正中央 釋放,每隻大鼠測試時間為5 min。每一隻動物完成測 試後,清理糞便,並對裝置用酒精進行徹底清潔消du。

測試指標:進入到開放臂次數(0E):即進入到任 ¥開放臂的次數,以大鼠4個爪均進入到臂內開始,中 途有1個爪從該臂中完全撤出,視為該次進入活動完 成;進入到開放臂時間(0T):進入到開放臂停留的時 間,單位:秒U);進入到閉合臂次數(CE):即進入到任 一閉合臂的次數,以大鼠4個爪均進入到臂內開始,中 途有1個爪從該臂中完全撤出,視為該次進入活動完 成;進入到閉合臂時間(CT),進入到閉合臂停留的時 間,單位:秒(s)。由以上指標分別計算出:①進開放 臂次數比例〇E% = OE“OE+CE) xl〇〇%;②開放臂停 留時間 t匕例 〇T% = OIV(OT+CT) xl〇〇%

 

討論

焦慮征大多是因為髒腑功能失調、氣機失常而導 致神誌不安,足M裏是足陽明胃經合穴,f陰交是肝、 腎、脾經的交會穴,這兩個穴位既能調節所屬髒腑的經 氣,同時又針對了焦慮征的病理特點進行zhi療。近年 來,三陰交、足S裏作為zhi療焦慮征的主要穴位,受到 廣大學者的關注。有實驗證明,電針三陰交可緩解自 然更年期大鼠的焦慮行為[6],針刺足三裏可減輕hai洛 因戒斷後所產生的焦慮症狀,且療效穩定[7]。本實驗 中,芭乐app最新版本下载官网選取了$陰交和足三裏進行針刺zhi療,觀察到 通過同時針刺這兩個穴位可明顯緩解酒精戒斷所產生 的焦慮症狀,由此芭乐app最新版本下载官网猜測針刺這兩個穴位可能存在 相互作用而使zhi療效果得到加強。單穴位的zhi療效果 並未如相關文獻中所了解的那麽顯著,這可能是由於 針刺的天數和時長不同所導致。電針療法是應用電針 儀輸出脈衝電流,通過毫針作用於經絡穴位以達到治 療ji病目的的一種方法,它將毫針的刺激和電生理的 效應相結合,這種方法不僅可以提高針刺的zhi療效果, 同時還增加了針刺的zhi療範圍,加強了針刺疏通經絡 的作用[8]。有文獻報道[9],電針zhi療焦慮征的效果與 抗焦慮藥wu的zhi療效果相當,且避免了藥wu所帶來的 依賴性等副作用。在本研究中,多項實驗結果也證實 了電針療法較普通針刺確有更好的療效。

大量的研究結果顯示,當機體受到內外環境的刺 激時,應激反應會表現出一係列的神經***物質的 變化,主要表現為HPA軸的興奮。下丘腦室旁核是HPA-神經***軸的中qu位點,CRH則是HPA軸激 活的關鍵性物質。適量的CRH的增多可使機體處於 興奮的狀態,但CRH的含量過高時,則可引起適應性的機製障礙,進而引發多種症狀的發生,其中包括焦 慮、抑鬱等。有研究表明,在應激刺激下,CRH的濃度 以及CRH mRNA的表達均顯著增加[1()]。在焦慮症狀 中所觀察到的ji素含量的變化主要是由CRH的過度 分泌所導致[11]。新近研究表明,CRH的受體拮抗劑 可作為抗焦慮以及抗抑鬱的神經藥理學zhi療方法[12]。 由本實驗結果芭乐app最新版下载黄也觀察到,酒精戒斷焦慮征大鼠的 海馬中CRH的濃度較空白組大鼠均増加,經針刺zhi療
後,其數值又下降至正常水平,由此證實了,CRH在焦 慮的發生中占有重要的地位。

焦慮征受多種基因和多種環境因素的調控,目前 發現其可能通過一係列的信號轉導級聯反應進行調 控。有研究表明,與G蛋白相偶聯的cAMP信號傳導 通路的異常與焦慮密切相關,這一論證從芭乐app在线安装的實驗 結果中得到了證實,酒精戒斷大鼠的cAMP的濃度升 高,針刺zhi療後得到緩解。cAMP是體內比較重要的 第二信使,它對多種神經遞質的功能發揮起調節作用。 近年來,有大量的研究結果證實,cAMP依賴的PKA 信號通路在酒精依賴的形成過程中具有重要的作用。 環磷腺苷效應元件結合蛋白(CREB)作為PKA重要 的下遊信號蛋白,在藥wu的成癮中也起著尤為重要的 作用,因此,近年,CREB在酒精成癮的相關研究中成 為又一備受關注的研究熱點。CREB通過結合cAMP 效應元件(CRE)調節基因的轉錄,CRE是在各種基因 調節區域中的順式增強子,CRH基因的上遊調節區中 存在CRE序列,而且已經證實,CRE的功能與CRH的 轉錄活性密切相關,由此為芭乐app在线观看的實驗結果提供證據: 針刺抗焦慮的作用可能通過調節cAMP-CRH相互作 用,終使酒精戒斷焦慮征得到緩解。同時由本實驗結 果證實了 cAMP、CRH之間可能確存在某種聯係,共同 調節酒精戒斷焦慮征的發生。

綜上所述,本實驗探究了針刺可緩解酒精戒斷期 間的焦慮樣行為,初步證實針刺可能通過cAMP-CRH 相互作用來緩解酒精戒斷焦慮樣症狀,為針刺療法開 發成為防治酒精複飲的有效zhi療手段提供實驗和理論 依據,也為綜合利用中醫療法zhi療其他du品成癮提供強有力的實驗支持。

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