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穿梭箱實驗在小鼠主動回避學習中的作用
點擊次數:722 發布時間:2020-03-16

目前,對於該腦區在主動回避學習中的調節 機製尚未完全明確。目的:探索中腦導水管周圍灰質氨基丁酸 (y-Aminobutyric acid,GABA)能神經元在主動回避學習中的調控作用。 法:通過穿梭箱實驗,對實驗小鼠進行主動回避訓練;通過早期即刻基 因c-fos免yi熒光染色確定小鼠PAG內c-fos表達的變化;利用腦立體定位 注射,將攜帶有hM3Dq或hM4Di基因的重組腺相關病毒定位注射於 Vgat-cre轉基因小鼠的PAG內,待2-3周後GABA能神經元穩定表達hM3Dq 或hM4Di。製備300|im厚度的PAG離體腦片,進行全細胞膜片鉗記錄, 記錄CNO對GABA能神經元活動的調節。應用化學遺傳學技術,在清醒 小鼠體內特異性激活或者抑製PAG的GABA能神經元,觀察改變GABA 能神經元的活動對小鼠主動回避學習能力的影響;結果:Vgat-ChR2-EYFP 轉基因小鼠在主動回避學習中存在延遲建立的特性;主動回避學習中,與 正常小鼠相比,建立遲緩的小鼠PAG內GABA能神經元激活的數量增多;PAG內表達hM3Dq的GABA能神經元被其配體**氯氮平-N-氧化物 (Clozapine-N-oxide,CNO)特異性激活,動作電位發放頻率增加,表達 hM4Di的GABA能神經元被CNO特異性抑製,神經元動作電位的發放頻 率降低;在主動回避學習過程中,使用CNO特異性激活PAG的GABA能 神經元可以延緩主動回避學習過程,使用CNO特異性抑製PAG的GABA

 

能神經元並不影響主動回避行為的建立。結論Vgat-ChR2-EYFP轉基因小 鼠存在主動回避學習障礙,PAG的GABA能神經元調節主動回避行為的建 立,激活PAG的GABA能神經元可以起到延緩主動回避行為建立的作用。

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